利血平注射液药物分析

　　方法名称： 利血平注射液—利血平的测定—分光光度法

　　应用范围： 本方法采用分光光度法测定利血平注射液中利血平的含量。

　　本方法适用于利血平注射液。

　　方法原理： 供试品加2%枸橼酸溶液稀释，用三氯甲烷振摇提取，1%碳酸氢钠溶液洗涤，再用甲醇稀释制成供试液，经前处理置紫外可见分光光度计，于390nm波长处测定吸收度，计算出其含量。

　　试剂： 1. 三氯甲烷

　　2. 无水乙醇

　　3. 2%枸橼酸溶液

　　4. 1%碳酸氢钠溶液

　　5. 甲醇

　　6. 0.3%亚硝酸钠溶液的50%甲醇溶液

　　7. 5%氨基磺酸铵溶液

　　8. 50%甲醇溶液

　　仪器设备： 紫外可见分光光度计

　　试样制备： 1.对照品溶液的制备

　　精密称取利血平对照品25mg，置100mL量瓶中，加三氯甲烷3~4mL使溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加三氯甲烷18mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

　　2. 供试品溶液的制备

　　精密量取供试品适量（约相当于利血平5mg），置100mL量瓶中，加2%枸橼酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置分液漏斗中，用三氯甲烷振摇提取3次（第一次6mL、第二、三次各5mL），每次振摇2分钟，分取三氯甲烷液，分别用同一1%碳酸氢钠溶液10mL振摇洗涤，分取三氯甲烷层置干燥的25mL量瓶中，水层再用三氯甲烷2mL提取1次，提取液并入量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

　　注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

　　操作步骤： 精密量取对照品溶液与供试品溶液各5mL，分别置10mL量瓶中，各加甲醇2mL、新制的0.3%亚硝酸钠溶液的50%甲醇溶液1.0mL与盐酸5滴，摇匀放置30分钟，各加新制的5%氨基磺酸铵溶液0.50mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，另取对照品溶液与供试品溶液各5mL，除以50%甲醇溶液1.0mL代替新制的0.3%亚硝酸钠溶液的50%甲醇溶液外，分别用同一方法处理后作为各自相应的空白，照紫外分光光度法，于波长390nm处测定吸收度。

　　注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。